实验原理采用脂类染料（如苏丹黑或油红O）对血清脂蛋白进行预染，随后将预染的血清置于琼脂糖凝胶板上进行电泳分离。在通电的情况下，脂蛋白向正极方向移动，形成多个分离区带。

试剂与器材：

1. 巴比缓冲液（pH 8.6，离子强度 0.075）：用于电极的缓冲液，由巴比/妥钠 154g，巴比/妥 276g，EDTA酸 0.292g加水溶解后稀释至1000ml。

2. 三羟甲基氨基甲烷缓冲液（pH 8.6）：作为凝胶缓冲液，由三羟甲基氨基甲烷 12.12g，EDTA酸 0.29g，NaCl 15.85g加水溶解后稀释至1000ml。

3. 琼脂糖凝胶：将琼脂糖 0.45g、三羟甲基氨基甲烷缓冲液 50ml和水 50ml加热至沸腾，待琼脂糖完全溶解后立即停止加热。

4. 挖槽工具：制作切口刀（刀口长15mm，中央夹有机玻璃或木片，用螺丝固定，使两片刀片相距15mm）和挖槽小匙（用直径15mm的铜丝锤成扁平状，一端磨光）。

5. 电泳槽及电泳仪器：与血清蛋白的醋酸纤维薄膜电泳仪器相同。

操作步骤：

1. 预染血清：将0.2ml血清与0.2ml苏丹黑染色液混合，置于37℃水中染色30分钟。随后进行离心（2000转/分，约5分钟）。

2. 制备琼脂糖凝胶板：将制备好的0.45%琼脂糖凝胶加热至溶化，用吸管浇注到载玻片上，每片约25ml，静置30分钟使其固化（在高温环境下可延长时间，或放入冰箱加速固化）。

3. 加入血清：在已固化的琼脂糖凝胶板一端约2cm处，用切口刀片垂直切入，然后将小条凝胶取出。用小片滤纸吸干小槽内水分，利用血色素吸管吸取约15μl预染血清注入小槽。

4. 电泳：将加载血清的凝胶板平行放入电泳槽，样品应位于阴极端。将浸透巴比缓冲液的三层纱布轻贴于凝胶板两端，确保其他一端浸入电泳槽的巴比缓冲液中（注意：此电极缓冲液不能用三羟甲基氨基甲烷缓冲液替代）。接通电源，设定电压为120~130V，电流为3~4mA。约15至55分钟后，即可观察到分离出的彩色带。

注意事项：

1. 电泳样品需使用新鲜的空腹血清。

2. 每块凝胶可平行挖两条小槽，以便添加两个不同样品。

3. 如果使用大小与小槽一致的有机玻璃片，在琼脂糖凝固前固定在适当位置，待凝固后取出有机玻璃片，小槽可直接用于加样，无需挖槽。

4. 若需要保留电泳样本，将电泳后的凝胶板（连同玻片）浸入清水中脱盐2小时，然后在约80℃的烘箱中烘干即可。

结果及临床意义：

1. 正常血清中的脂蛋白一般可观察到三条区带，分别为β-脂蛋白（最深色带）、前β-脂蛋白（最浅色带），及α-脂蛋白（略深于前β-脂蛋白），并且在原点处应无乳糜微粒。

2. 如果前β-脂蛋白显著深于α-脂蛋白，同时伴随血清甘油三酯明显升高及胆固醇正常或略高，则可诊断为Ⅳ型高脂蛋白血症。

3. 当β-脂蛋白区带比正常血清明显深染，伴随血清总胆固醇显著升高而甘油三酯正常者，可诊断为Ⅱa型；若伴随血清总胆固醇增高而甘油三酯略高的前β溶解则为Ⅱb型。

4. 当β-和前β-两区带未能分离且相连称为“宽β区带”，此时伴随血清甘油三酯和胆固醇的双重增高可诊断为Ⅲ型。

5. 若在原点处出现乳糜微粒，同时β-及前β-正常或降低，并伴随血清甘油三酯显著升高，可能被诊断为Ⅰ型。

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